Es el protagonista masculino de la serie. Aono Tsukune es un ser humano promedio que por error se inscribió en la Academia de Monstruos Yökai. En el camino a la escuela tiene su primer encuentro con Akashiya Moka, una vampiro que se interesa en él debido a su soledad vivida en el mundo de los humanos y... por el dulce sabor de su sangre. Aunque no tiene poderes especiales siempre intenta proteger a sus amigos a costa de su vida; y es el único que puede quitar el rosario que lleva Moka
Moka Akashiya (赤夜 萌香, Akashiya Moka?) (Seiyū: Nana Mizuki):
Akashiya Moka es la primera persona en hablar con Tsukune. Moka es un vampiro y aun así le toma cariño a Tsukune, y después de probar su sangre se vuelve adicta a éste. Cuando se le retira el rosario de su pecho, se libera su verdadera naturaleza; fría y orgullosa, esta Moka es una entidad completamente diferente a cuando tiene el collar (que es dulce y amable). Pero el rosario es solo un sello protector ya que la moka original es su identidad vampira, en su infancia Moka decidió sellar sus poderes de vampiro con el rosario, pero mientras más se transforma en la moka-vampira el sello se debilita.
Seiyū: Misato Fukuen
Kurumu Kurono es una estudiante de la Escuela Youkai, en si ella es una Súcubo, logrando asi, la atracción de muchos estudiantes con sus senos exageradamente grandes, estaba celosa de la popularidad de Moka sobre los demás chicos, en especial que siempre andaba con Tsukune. Por venganza seduce a Tsukune para intentar ponerlo en contra de Moka y causar asi problemas entre ellos, para lograrlo utilizó sus tecnicas de monstruo, en lo cual consiste en el Encanto del Succubus en ni, ya sea por sus ojos o por su fisico. Durante la batalla contra Moka, revela que su especie está casi extinta y que la única forma de sobrevivir es con un "elegido" que se hace dentro de cientos de hombres. Kurumo es vencida facilmente por Moka y recapacita con ellos, aunque no se rendirá en lo que es obtener a Tsukune.
Dentro del manga, Kurumu no presenta diferencias entre los acontecimientos entre el anime y el manga. Se puede destacar que un elemento que fue olvidado fue en cierta sección del manga donde revela los verdaderos poderes de un súcobo, el cual es crear ilusiones sumamente fuertes el cual dan por resultado golpes fatales.
En el anime, Kurumu presenta más deseperación por obtener a Tsukune. Uno de los aparentes "hobbies" de Kurumu es molestar a Yukari con la increible diferencia de senos que poseen, lo cual causa molestia a Yukari y a la vez satisfacción en ella. En el anime, el verdadero poder de Kurumu no se muestra, se puede dar una alusión al momento que se enoja con Ruby a tal grado de crear una aura negra y que sus ojos se iluminen, pero no se sabe al respecto.
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YukariSendo (仙童 紫, Sendo Yukari?)
Seiyū: Kimiko Koyama
Yukari Sendo es una personaje de la serie ficticia de Rosario + Vampire. Es una estudiante de la Escuela Youkai con 11 años de edad, por lo que es considerada la más pequeña al igual que la de menor edad. Es una bruja, siempre se ve con un tipico traje de bruja, el cual sería la capa y el sombrero. Es la más inteligente de la Academia con el ramking de la más inteligente. Inicialmente era apartada, seria y muy solitaria a tal grado de hacer bromas a quien se burlara de ella. Después de que conoció a Akashiya Moka se enamoró de ella. Cuando fue rescatada por Tsukune en el que arriesgó su vida, también se enamora de él a tal punto de tener fantasias con los 2, lo que crea un pequeño trío amoroso.
En el manga, Yukari hace más problemas y su amor a Moka y Tsukune es aun más fuerte. Muchos episodios del manga, sobresale Yukari por su inteligencia y buen uso de magia. También cabe destacar que Yukari tuvo más problemas al ir mundo humano ya que en si, odiaba a los humanos y estar cerca de ellos, le daba mareos. Su amistad es más fuerte con Rubi a diferencia del anime, ya que en este ambas se entienden y no temen decirse las cosas por la desgracia que los humanos les han causado.
A diferencia del manga, Yukari es molestada muchas veces por Kurumu cuando hace comparaciones en tamaño sobre los senos por lo que son las chicas que más pelean. Yukari utiliza mucho su varita mágica para hacer que aparescan objetos bizarros. Su ataque basico es utilizar grandes ollas con las que siempre utiliza para golpear en la cabeza. Su ataque más fuerte sn unas cartas del Tarot aladas que utiliza para cortar o desgarrar.
En el episodio 3 de Capu2, sus padres aparecen, donde su madre presenta el traje de bruja que utiliza Yukari y su padre viene vestido formalmente. No hacen mucho en dicho episodio, pero tienen una magia muy fuerte. Ruby queda emocianada al conocerlos.
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Mizore Shirayuki (白雪みぞれ, Mizore Shirayuki?)
Seiyū: Rie Kugimiya
Mizore Shirayuki es una personaje ficticio del anime y manga de Rosario + Vampire. Es ua estudiante de la Academia Youkai donde su ausencia es prolongada por lo que no asiste desde algun tiempo (igual en manga y anime). En si ella es una Yuki-onna (mujer de las nieves), lo que le permite facilidad en el control y manipulación del hielo, nieve y agua. Su mayor caracterisitca es que siempre pasa chupando una paleta. Mizore era muy huraña, por lo que le cuesta confiar en los demás. Conoce a Tsukune y le toma amor, pero decide que debe ser por la fuerza y eliminar al que se interponga, en este caso Moka. Su personalidad es fría y no expresa mucho o habla.
Mizore se presenta como una chica normal a la que le atrae el perdiódico escolar, pero más que todo Tsukune, intenta apartarlo de Moka y a la vez intentar matarla. Mizore se enamora de Tsukune porque para ella, él es tan miserable como ella. Despues de muchos problemas, la aceptan en el gurpo y en el club del periódico
En el anime, Mizore se presenta mucho antes dandole un papel de personaje mucho mayor. Los acontecimientos en los que se dan la ejecución de Tsukune y en el que visitan el campo de flore, hace aparición, en el manga no vive dichos acontecimientos, se presenta despues de estos. A diferencia del manga, agregaron el humor de que apareciera inesperadamente en el lugar menos indicado y espiando a Tsukune, por lo que obtuvo el nombre de "acosadora".
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Rubi Tōjō (橙条 瑠妃, Tōjō Rubi?)
Seiyū: Saeko Chiba
Una bruja del mundo humano, Ruby Dojo trató de destruir a la humanidad para evitar que el santuario de su Maestra, un campo de girasoles, se convirtiera en un tiradero de basura. Su odio hacia los humanos proviene desde que sus padres hayan muerto debido a un accidente automovilístico. Después de haber recibido ayuda de Tsukune y sus amigos después de una batalla; y recordando el tipo de amor que sus padres le habían dado, ella decide olvidar su venganza y decide vivir en la Academia Yokai no como una estudiante oficial, sino como una miembro del club de periodismo, principalmente para estar cerca de Tsukune.
Gen'ei Morioka (森丘银影, Morioka Gin'ei?)
Seiyū: Tomokazu Seki
El presidente del club de prensa, al que pertenecen Tsukune y sus amigas. Comúnmente como "Gin", él es un Hombre lobo astuto, veloz y pervertido que inculpaba a Tsukune de sus actos. Posteriormente recobra la confianza de los demás, convirtiéndose en un senpai para Tsukune y sus amigos. Aunque deja sus esquemas (para que otros estudiantes dejarán de llamarle pervertido), sus afectos se encuentran con Moka, aunque el amor es totalmente unilateral, y él todavía no ha renunciado a ella. Cabe señalar que éste licántropo no ha cambiado de opinión acerca de tratar de impresionar a otras chicas. Mientras trabaja en el club tiende a dejar todo el trabajo a sus subordinados, en particular la distribución del periódico. Cuando hay una luna llena brillante, adquiere un aumento de su capacidad hasta el punto en que su velocidad es superior a Moka en su estado de vampireza.
Kokoa Shuzen (朱染 心愛, Shuzen Kokoa?)
Seiyū: Chiwa Saito
Haciendo su aparición en la segunda temporada, Kokoa Shuzen es la media hermana menor de Moka Akashiya. En apariencia es similar a Moka, a excepción de sus ojos y su cabello naranja. Ella cursa el primer grado de estudios en la Academia Yokai. Al igual que su hermana, Kokoa es una super-vampireza, pero sus poderes no se comparan. Como no posee la misma fuerza sobrenatural que Moka, Kokoa compensa su poder con su mascota murciélago: Kö, que puede transformarse en una variedad de armas y artefactos con la fuerza suficiente como para hacer de ella una oponente formidable.
Shizuka Nekonome (猫目 静, Nekonome Shizuka?)
Seiyū: Kikuko Inoue
Una de los muchos profesores de la Academia Yokai, Shizuka Nekonome es la tutora del club de periodismo. Ella es una mujer-gato, es algo despreocupada en su actitud, y algo olvidadiza a ciertas cosas. Debido al monstruo que es, a la maestra Nekonome le encanta comer pescado, especialmente los Peces-Dorados. En el anime, Shizuka no parece despreciar a los seres humanos, contraparte de sus demás compañeros de trabajo, hasta un punto tal, que promueve la convivencia armónica entre demonios y humanos.
